畜牧兽医学报 ›› 2015, Vol. 46 ›› Issue (12): 2153-2160.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.12.005
耿立英1,2,张宇1,2,李祥龙1,2*,周荣艳2,李兰会2,王志刚2
GENG Li-ying1,2,ZHANG Yu1,2,LI Xiang-long1,2* ,ZHOU Rong-yan2,LI Lan-hui2,WANG Zhi-gang2
摘要:
旨在研究山羊卵巢维持基因FOXL2启动子活性以及探究该基因的调控机理。从NCBI数据库调取FOXL2基因启动子序列,用生物信息学软件对其核心启动子和转录因子进行预测分析。使用 PCR技术克隆FOXL2基因启动子序列,并构建一系列缺失载体,瞬时转染293T和A375细胞,利用双荧光素酶基因检测仪测定相对荧光素酶活性值。结果表明,该基因启动子区域存在两个典型的CpG岛,分别位于(-920/+51(972 bp))和(+125/+555(430 bp))区域;经Kpn Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切鉴定表明,重组载体质粒构建正确;在细胞中插入不同长度的FOXL2基因启动子片段,随着启动子5′端截短,荧光素酶转录活性先升高再逐渐降低。(-934/+324)区域存在转录活性,(-32/+324)区段包含了转录的基本元件;(-934/-456)区域在转录过程中对FOXL2基因起负调控作用,(-456/-192)区域为正调控区域。
中图分类号: